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编号:10246256
SCI-OS人骨肉瘤裸小鼠皮下移植模型的建立
http://www.100md.com 《肿瘤》 2000年第5期
     作者:姚明 孔韩卫 李江 何荣根

    单位:姚明 孔韩卫(上海市肿瘤研究所 上海 200032);李江 何荣根(上海第二医科大学口腔医学院)

    关键词:

    肿瘤000528 中图分类号:R73.35 文献标识码:A

    文章编号:1000-7431(2000)05-0351-01

    骨肉瘤是骨原发性恶性肿瘤中最常见的,约占骨恶性肿瘤的1/3,该肿瘤恶性程度高,预后差。因此,建立相应的肿瘤模型对骨肉瘤的基础和应用研究均有较大价值[1]

    材料与方法

    一、实验动物 BALB/c-nu/nu裸小鼠,由本所实验动物室提供(SPF级,医学实验动物合格证02-30-1),鼠龄5~8周,雌雄兼用,每代4~6只,饲养和实验均严格按照SPF规范要求。
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    二、肿瘤组织 取自上海第二医科大学口腔医学院外科手术切除标本,该病人为32岁女性,左下颌骨长有一5.5 cm× 4 cm×4 cm大小肿块,病理诊断为骨肉瘤。

    三、肿瘤的移植和传代 在无菌条件下,将瘤源切成直径约2 mm大小的瘤块,用20号穿刺针把瘤块移植至裸小鼠右侧近前肢腋下,待肿瘤长至直径约1 cm~1.5 cm时,再按上述方法进行移植传代[2]

    四、生物学特性观察 肿瘤移植后,定期观察肿瘤生长情况,潜伏期,荷瘤寿命,测量肿瘤长径a和短径b,按公式V=πab2/b计算肿瘤体积。手术切除的骨肉瘤标本和传代后的肿瘤组织及脏器,用10 %中性福尔马林固定,石蜡包埋切片,HE染色,组织病理学观察。

    结 果

    一、裸小鼠皮下移植模型的建立 第一代接种的5只裸小鼠,仅2只出现肿瘤,潜伏期约为21天,至56天肿瘤直径约为1 cm,利用移植瘤组织反复皮下接种传代,至第四代肿瘤移植成功率为100 %(4/4),潜伏期12~14天,肿瘤直径长至1 cm 约42天,随着传代代数的增加,肿瘤潜伏期缩短,肿瘤生长加快,逐步趋于稳定,至今已传至11代,定名为SCI-OS。肿瘤移植第10代时移植成功率100%(6/6)潜伏期8~10天,3周时瘤体积169.56±34.28 mm3,6周时瘤体积2156.50±412.37 mm3 ,7周开始坏死,荷瘤寿命约14周。
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    二、移植瘤病理形态学 肿瘤外表较为完整,质地中等,中心较硬,色泽灰白,肿瘤表面供血较丰富,与周围无粘连。骨肉瘤细胞形态为圆形或不规则,核大异形而深染,核仁明显,核分裂相多见,肿瘤细胞分布密集,排列杂乱,细胞间质较少,与手术标本的病理形态学相似,脏器及淋巴结未见转移。

    讨 论

    骨肉瘤是好发于青少年的恶性骨肿瘤,年龄越大,发病率越低,说明骨肉瘤多发生在骨骼生长发育的旺盛时期,其恶性程度又较高,是危及生命的重要肿瘤之一,而建立一个理想的骨肉瘤移植性动物模型,对骨肉瘤基础研究,抗肿瘤药物筛选和临床治疗,具有重大的现实意义,国内这方面报道较少[3]

    SCI-OS人骨肉瘤裸小鼠皮下移植模型,直接来源于临床手术标本,模型建立初期,肿瘤成功率低,均一性差,肿瘤生长缓慢,随着传代代数的增加,移植成功率增加至100 %,肿瘤生长加快,肿瘤生长趋于稳定,肿瘤间个体差异变小,这可能和肿瘤手术标本细胞成份较杂(包括正常组织、坏死组织、恶性肿瘤组织及恶性较低的肿瘤组织等成份)有关,移植传代也是一个筛选过程,从该模型的潜伏期,生长速度、荷瘤寿命、病理组织学的结果来看,也证明了这一论点。SCI-OS人骨肉瘤裸小鼠皮下移植模型已应用于肿瘤药物筛选,肿瘤基因治疗等相关研究。该模型的其它一些生物学特点,有待于今后进一步探讨。
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    作者简介:姚明,男,大专,助理研究员。

    参考文献

    [1]师长宏,施阳,施新猷,等.两株人成骨肉瘤克隆细胞株的建立及其生物学特性〔J〕.上海实验动物科学,1999,19(3):146

    [2]姚明,刘炳亚,孔韩卫,等.SCID小鼠的繁育及其在肿瘤研究中的初步应用〔J〕.上海实验动物科学,1998,18(1):19

    [3]吴逸明,安玉会主编.基础肿瘤学〔M〕.郑州河南医科大学出版社,1998:58

    (收稿日期:2000-07-14), 百拇医药